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技術文章

生命科學PCR熱循環儀做實驗需要哪些耗材?

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PCR儀在使用過程中通常需要以下一些耗材:


一、反應管

1、薄壁管:一般為聚丙烯材質,有 0.2ml、0.5ml 等常見規格,適合用于放置 PCR 反應體系,能很好地適配 PCR 儀的加熱模塊,保障熱量均勻傳遞,利于反應高效準確地進行。

2、八聯管:將多個反應管連在一起,方便同時進行多個樣本的反應操作,常用于批量樣本檢測等情況,例如在對多個基因位點同時檢測或者多份臨床樣本篩查時使用,能提高工作效率。


二、管蓋

與反應管配套使用,防止反應過程中液體揮發以及避免外界物質污染反應體系,確保反應成分處于相對穩定的環境,保障 PCR 反應正常進行。


三、吸頭

1、普通吸頭:用于準確吸取和轉移各種 PCR 相關的液體試劑,像模板 DNA 溶液、引物溶液、PCR 反應緩沖液、Taq 酶等,規格多樣,常見的有 10μl、20μl、100μl、1000μl 等,可依據吸取液體的量來選擇合適規格的吸頭,保障移液的準確性。

2、濾芯吸頭:其內部帶有濾芯,在吸取樣本等操作時,能夠防止氣溶膠等雜質進入吸頭內部進而污染移液器,避免交叉污染,尤其適用于對樣本純凈度要求較高的實驗,比如在分子診斷、基因克隆等高精度實驗中的試劑吸取操作。


四、PCR 反應試劑

1、DNA 聚合酶(如 Taq 酶等):是 PCR 反應的關鍵酶,能夠以 DNA 為模板,在引物的引導下,按照堿基互補配對原則合成新的 DNA 鏈,不同的酶適用于不同的反應條件和實驗需求,例如有的 Taq 酶具有較高的熱穩定性和擴增效率。

2、dNTPs(脫氧核糖核苷三磷酸):包含 dATP、dTTP、dCTP、dGTP 四種,是合成新 DNA 鏈的原料,為 PCR 反應中 DNA 鏈的延伸提供所需的核苷酸單體。

3、引物:是人工合成的短鏈 DNA 片段,能與模板 DNA 的特定區域互補結合,引導 DNA 聚合酶起始 DNA 鏈的合成,引物的設計質量和特異性對于 PCR 反應能否準確擴增出目標片段起著至關重要的作用。

4、緩沖液:為 PCR 反應提供適宜的酸堿度、離子強度等反應環境,保障 DNA 聚合酶等相關成分能穩定發揮作用,不同的酶配套的緩沖液成分會略有差異,但通常都含有維持 pH 穩定的成分以及鎂離子等對酶活性有影響的離子成分。


根據實驗類型(常規PCR、qPCR、數字PCR等),耗材和試劑可能需調整。建議參考儀器說明書和實驗方案選擇適配產品。

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